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硅胶基质液相色谱柱操作步骤和维护
发布时间:2019-05-26   点击次数:162次
硅胶基质液相色谱柱的平衡
反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且色谱柱的寿命也会变得更长。
 
硅胶基质液相色谱柱操作步骤:
a. 平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
 
b. 如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡; 分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
 
硅胶基质液相色谱柱的维护:
a.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
 
b.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围
 
c.避免流动相组成及极性的剧烈变化
 
d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
 
e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存于甲醇或乙腈中
 
f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。

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