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薄层色谱TLC的定性检测方法
发布时间:2019-07-27   点击次数:144次
薄层色谱TLC是以涂布于支持板上的支持物作为固定相,以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行定性与定量分析、分离和鉴定的一种层析分离技术。
 
薄层色谱TLC的定性检测:
展开完毕后,把薄层从层析缸中取出,用铅笔划出或小针刺出展开剂前缘的位置,随即进行显色,以确定各个斑点的位置、Rf值和显色的情况,从而判断试样中含有哪些组分。有色物质经展开后呈现明显的色斑,很易判断。对于无色物质,可根据化合物的性质,用物理检出法、化学检出法、酶与生物检出法和放射性检出法进行显色。
1)物理检出法:紫外光、碘、水
 
2)化学检出法:化学检出法是在薄层上使用一种或数种化学试剂与被检出物质反应,生成有颜色的化合物而定位。这种试剂叫显色剂。
显色剂一般分为两类,即通用显色剂和专属性显色剂
(1)通用显色剂:
a.浓硫酸或50%的硫酸溶液:极大多数有机物质,喷此种显色剂后立刻或在加热到110—120℃并经数分钟后出现棕色到黑色斑点。
b.酸碱指示剂溶液:例如0.3%溴甲酚绿甲醇溶液,在绿色背景上显现黄色斑,表示是脂肪族羧酸。常用的通用显色剂还有:5%磷钼酸乙醇、碱性高锰酸钾溶液、硝酸银-氢氧化铵试剂、荧光显色剂等。
(2)专属性显色剂,指能使某一类或少数几类官能团或化合物显色的试剂。
 
3)原位化学衍生化
 
4)生物与酶检出法
 
5)放射显影法
 

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