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聚合物基质液相色谱柱的维护分为哪几部分
发布时间:2019-07-10   点击次数:131次
聚合物基质液相色谱柱具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格。该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。广泛用于各种不同基质中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的分离。Carbo-H可以用来分析有机酸及利巴韦林等物质,Carbo-Ca可以用来分离树胶醛糖、阿糖醇等糖类。
聚合物基质液相色谱柱采用聚合物基质填料,色谱柱化学稳定性好,寿命长,分离效果随时间变化小。能用碱性溶液进行清洗再生。适用于蒸发光散射检测器、电雾化检测器以及LC/MS。
 
聚合物基质液相色谱柱的维护分为:色谱柱的平衡、色谱柱的再生、然后才是色谱柱的维护。下面详解:
1.色谱柱的平衡
反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。 每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长。
操作步骤:
a.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
 
b.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡; 分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
 
2.色谱柱的再生
长期使用的色谱柱,往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对色谱柱进行再生,在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。
选择再生方法:
极性固定相的再生:
正庚烷→lv仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水
非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→lv仿(或异丙醇)→乙腈→水
 
聚合物基质液相色谱柱的维护
a.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)。
b.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围。
c.避免流动相组成及极性的剧烈变化。
d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理。
e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存于甲醇或乙腈中。
f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。

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